C10723CellEvent™ 半胱天冬酶-3/7 檢測試劑
- 發(fā)布日期： 2025-08-28
- 更新日期： 2025-09-23
產品詳請
| 產地 |
美國
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| 保存條件 |
無
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| 品牌 |
Gibco
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| 貨號 |
C10723
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| 用途 |
細胞培養(yǎng)
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| 組織來源 |
無
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| 細胞形態(tài) |
無
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| 是否是腫瘤細胞 |
否
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| 保質期 |
無
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| 器官來源 |
無
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| 免疫類型 |
無
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| 品系 |
無
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| 生長狀態(tài) |
無
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| 物種來源 |
無
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| 包裝規(guī)格 |
1 kit
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| 是否進口 |
是
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CellEvent 半胱天冬酶-3/7 綠色和 CellEvent 半胱天冬酶-3/7 紅色檢測試劑是適用于活細胞中活化的半胱天冬酶-3/7 的新型熒光底物，這些活細胞可通過免疫熒光 (IF) 和免疫細胞化學 (ICC) 等抗體檢測工作流程進行固定和多通路檢測。半胱天冬酶-3 的激活是細胞凋亡過程中的重要事件，使得這些優(yōu)化試劑可用于分析凋亡細胞。CellEvent 半胱天冬酶-3/7 紅色檢測試劑也可用于檢測 GFP 表達細胞中的細胞凋亡。
這些指示劑的特點包括：
?用于細胞凋亡分析的經優(yōu)化半胱天冬酶-3/7 底物
? 易于使用—只需加入和讀取；無需細胞裂解
? 用于時程測量；易于選擇目標時間點
? 與活細胞熒光成像和甲醛固定法兼容
? 支持多通道檢測—與其他熒光試劑結合，證實同一細胞或細胞群中的細胞凋亡
CellEvent™ 半胱天冬酶-3/7 綠色檢測試劑： 吸收/發(fā)射波長 ～502/530 nm?？墒褂?FITC/GFP 傳統(tǒng)濾光片組進行檢測。
CellEvent™ 半胱天冬酶-3/7 紅色檢測試劑： 吸收/發(fā)射波長 ～590/610 nm?？墒褂脗鹘y(tǒng) Texas 紅色濾光片組進行檢測。
CellEvent™ 半胱天冬酶-3/7 紅色檢測試劑和 CellEvent™ 半胱天冬酶-3/7 綠色檢測試劑以干粉形式提供。僅需向干粉中加入 100μL PBS 即可制備 100X 儲備液。用完全培養(yǎng)基按 1:100 的比例稀釋該 100X 儲備液，染色細胞 30-60 分鐘，然后用熒光顯微鏡分析。
CellEvent™ 半胱天冬酶-3/7 紅色檢測試劑也以即用型 DMSO 溶液形式提供。DMSO 溶液為 400X 即用型儲備液。僅需用生長培養(yǎng)基按 1:400 的比例稀釋該儲備液，然后染色細胞 30-60 分鐘。
為了防止凋亡細胞被洗掉，染色結束時無需洗滌。染色細胞可進行活分析或用 4% 多聚甲醛溶液固定，例如含 Image-IT™ 多聚甲醛 4% 的 0.1M 磷酸鹽緩沖液 (pH 7.4)（貨號：I28800）。這些固定細胞可以進一步處理，以用于 ICC 工作流程。
底物特異性
CellEvent 半胱天冬酶-3/7 檢測試劑是與核酸結合染料偶聯(lián)的四氨基酸肽 (DEVD)。DEVD 肽序列是半胱天冬酶-3/7 的切割位點，并且偶聯(lián)的染料不發(fā)出熒光，直到從肽上斷裂并與 DNA 結合為止。
作用機制
由于 DEVD 肽可抑制染料與 DNA 結合的能力，CellEvent 半胱天冬酶-3/7 綠色檢測試劑本身不發(fā)出熒光。然而，凋亡細胞中半胱天冬酶-3/7 激活后，DEVD 肽斷裂，使染料能夠結合到 DNA 上并反應產生明亮的熒光。
簡易的三步方案
使用 CellEvent 半胱天冬酶 3/7 檢測試劑，只需將其添加到細胞中，孵育 30–60 分鐘，即可進行觀察。含已激活半胱天冬酶-3/7 的凋亡細胞具有明亮的綠色或紅色細胞核，而不含已激活半胱天冬酶 3/7 的細胞只發(fā)出微弱的熒光信號。
測定的多功能性可實現對活細胞進行檢測和固定
該穩(wěn)健的測定使研究人員能夠對活細胞中半胱天冬酶-3/7 的激活進行檢查。此外，由于清洗步驟不是檢測所必需的，通常在清洗步驟丟失的脆弱的凋亡細胞會被保存。重要的是，CellEvent 半胱天冬酶 3/7 檢測試劑發(fā)出的熒光信號可在固定和透化過程中保存下來。這允許靈活地進行終點測定，并使用免疫細胞化學方法探測其他關注的蛋白質。
